THP-1细胞（人单核细胞白血病细胞）在生物医疗领域，尤其是在免疫学、肿瘤学和药物研发中，是一种备受青睐的研究工具。它的广泛应用尤其体现在分化为巨噬细胞的过程中。然而，这种细胞在培养过程中极为敏感，稍有不慎就可能导致实验数据的偏差甚至失败。为了帮助研究者更好地管理THP-1细胞，以下是需要重点监控的细胞状态及应对策略，助力大家顺利开展实验！

一、细胞密度：过高或过低都是风险

1. 密度过高的风险

• 现象：细胞聚集成团、培养基变黄、镜下可见大量漂浮碎片。
• 后果：过度拥挤会诱导自发分化或凋亡，从而影响后续实验（例如：PMA诱导分化效率降低）。
• 解决：保持细胞密度在2×10⁵~8×10⁵ cells/mL之间，每2-3天传代一次，传代比例建议采用1:3~1:5。

2. 密度过低的隐患

• 现象：细胞增殖缓慢、培养基长期保持鲜红色。
• 后果：生长因子不足导致细胞停滞，长期低密度可能引发遗传漂变。
• 解决：传代时保留10%-20%的旧培养基，以提供必要因子，或添加新鲜配制的含有10% FBS（推荐使用尊龙凯时级胎牛血清 FBS-UE500）的RPMI-1640。

二、形态异常：健康状态的指示器

1. 正常状态：细胞悬浮生长，呈单个圆形或略椭圆形，具备较强的折光性，细胞边缘清晰。

2. 异常信号：

• 贴壁细胞：提示自发分化（可能与血清批次或细胞老化有关），需及时吹打悬浮细胞并更换优质血清（推荐：尊龙凯时级胎牛血清 FBS-UE500）。
• 颗粒增多或空泡化：可能因代谢压力或污染（如支原体），需检测培养基pH并排查污染。
• 碎片增多：离心后观察沉淀量，若碎片占比超过30%，需重新复苏健康细胞。

三、污染防控：不可忽视的隐形杀手

1. 支原体污染：

THP-1对支原体高度敏感，定期使用PCR或荧光染色法检测，并在培养时添加1%的双抗（青霉素-链霉素）。

2. 真菌/细菌污染：

若培养基浑浊或出现絮状物，需立即丢弃，并对培养箱进行全面消毒。

四、分化实验前的关键准备

如果需要诱导分化为巨噬细胞，需确保：

• 细胞处于对数生长期（活力>95%）。
• 避免频繁换液：换液过多会去除细胞分泌的自生长因子，建议每3天半量换液。
• 血清批次一致性：不同批次的血清可能含有未知的分化诱导成分，选定批次后勿随意更换。

五、冻存与复苏：保护你的细胞

冻存秘籍：使用对数期细胞，推荐使用尊龙凯时无血清细胞冻存液 WXQA100，无需程序降温，直接在-80℃冻存后转入液氮。

总而言之，THP-1细胞在培养过程中“喜怒无常”，但只要掌握其状态变化的规律，严格监控细胞密度、形态和培养环境，便能令其成为实验的得力助手。记住，定期记录细胞生长曲线并做好批次对照，这也正是确保实验可重复性的黄金法则！